【求助】电镜取材时需要用4%PFA心脏灌流固定吗？

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usign

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1楼

这个帖子发布于8年零280天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

请各位大侠帮帮忙：本人欲取大鼠脑组织行透射电镜检测显微结构，请问取材时需要用4%多聚甲醛行心脏灌流固定吗？还是直接取材固定于电镜液中？谢谢！

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2012-04-20 22:39 浏览 : 2630 回复 : 1

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2楼

可以先用4%多聚甲醛固定，电镜室工作人员还会经专门处理细修后重新固定；而且预先用4%多聚甲醛固定后取材、修块等也都会方便一些~~不过最好根据自己的标本材料咨询一下电镜室的相关人员~~
另外取材还应注意以下问题：
低温操作: 尤其是夏天一定要注意在冰块下保持低温。为降低组织细胞酶的破坏作用, 最好在4℃下操作, 所用容器、器械及戊二醛固定液均需预冷；
动作迅速: 活体取材, 组织离体后应快速放入预冷的专用新鲜化学固定液中, 使组织和细胞尽可能保持原来的状态。要求操作熟练, 动作迅速；
减少损伤: 选择锋利的切割器械尽量或避免减少牵拉或挤压组织, 因为这样会使组织结构发生明显的变化；
大小适宜: 为了使组织得到均匀而充分的固定,所取材料一般要小于1 mm3, 样品太大固定液对组织的穿透力弱, 会造成固定失败；
部位准确: 如不准确会导致实验失败。如要观察肾小球部位, 却取到了肾的髓质部分。要求取材者要有一定的组织学基础和固定经验；离心: 细胞团块的样品的离心如不符合要求, 会使组织松散, 数量过少, 黏液蛋白没有除去而影响固定和脱水的进行。

2012-04-23 00:10

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